فاسفورک ایسڈ پیپٹائڈ کی تفہیم

یہ زندگی کے عمل میں ایک اہم کردار ادا کرتا ہے، فاسفوریلیٹنگ ٹائر، سیر، تھر، پیپٹائڈس پر واقع ہے۔فاسفوریلیٹڈ امینو ایسڈ عام طور پر فاسفورک ایسڈ پیپٹائڈ کی تیاری میں استعمال ہوتا ہے، فی الحال واحد فینائل فاسفوریلیٹ امینو ایسڈ میں استعمال ہوتا ہے۔HBTU/فاسفوریلیٹڈ امینو ایسڈز عام طور پر فاسفوریلیٹڈ امینو ایسڈ HOBt/DIEA طریقہ کار کو جوڑنے کے لیے استعمال ہوتے ہیں، لیکن فاسفورک ایسڈ پیپٹائڈ اس نقطہ نظر کی خرابیوں کا انتخاب کر رہے ہیں، خاص طور پر پیدا ہونے والے زیادہ لمبے پیپٹائڈ پیپٹائڈز یا امینو ایسڈ فاسفیٹ میں، جوڑنے کی کارکردگی کم ہے، حتمی مصنوعات کی پاکیزگی.اس فاسفوپیپٹائڈ کے لئے، ہم نے فاسفوریلیشن کے بعد کے ایک منتخب نقطہ نظر پر غور کیا۔جنریشن کا عمل امینو ایسڈ سائیڈ چین حفاظتی گروپوں کا انتخابی ہٹانا ہے جن پر پیپٹائڈ کی ترکیب کے بعد لیبل لگانے کی ضرورت ہے۔Tyr کے لیے، Thr غیر محفوظ سائڈ چینز کے ساتھ امینو ایسڈ کا استعمال کرتے ہوئے براہ راست رد عمل ظاہر کر سکتا ہے۔-Ser (trt)، مقداری طور پر 1%TFA/DCM ماحول پر ہٹا دیا گیا۔

فاسفوریلیشن، ڈبل بینزین فاسفائٹ فاسفورامائڈ اور چار نائٹروجن کے ساتھ پیدا ہوتے ہیں اور فاسفورامائڈ ٹیٹرازولیم ایکٹو انٹرمیڈیٹس، ہائیڈروکسی سے منسلک ہوتے ہیں، پھر ایسڈ پیرو آکسائیڈ آکسیڈیشن فاسفوریل کی تشکیل کے تحت، مکمل ردعمل ہوتا ہے۔

فی الحال، پیپٹائڈ فاسفوریلیٹ ترمیم کا طریقہ دو اہم اقسام ہیں:

(1) پولی پیپٹائڈ کی ترتیب میں معتدل طور پر ضمانت شدہ فاسفوریلیٹڈ امینو ایسڈ کا براہ راست تعارف؛

(2) پیپٹائڈ کی ترتیب پر پیدا ہونے والی رال کے بعد، سائیڈ چین ہائیڈروکسیل کے Ser، Tyr، یا Thr فاسفوریلیشن تک۔

1) اعتدال پسند گارنٹی فاسفوریلیٹڈ امینو ایسڈ براہ راست پیپٹائڈ کی ترتیب کو متعارف کرائیں گے:

یعنی، امینو ایسڈز جن کو فاسفوریلیٹ کرنے کی ضرورت ہے فاسفوریلیٹ کیا جائے گا اور (Thr،Ser یا Tyr) کا استعمال کرتے ہوئے پہلے سے مناسب طور پر محفوظ کیا جائے گا، اور پھر فاسفوریلیشن کو پولی پیپٹائڈ انڈیکس کے انتخاب کے نقطہ تک محدود کر دیا جائے گا جس کی بنیاد پر عام SPPS جنریشن کے عمل کی بنیاد پر۔ .یہ طریقہ کام کرنے کے لئے آسان ہے، پیپٹائڈ انٹرپرائزز فاسفوریلیٹ ترمیم کا بنیادی طریقہ بن گیا ہے.

2) پیپٹائڈ کی ترتیب پر پیدا ہونے والی رال کے بعد، سیر ہائیڈروکسی فاسفوریلیشن، ٹائر، یا تھر سائیڈ چینز تک:

فاسفوریلیشن ڈیکوریشن پولی پیپٹائڈ کے طریقہ کار میں سنگل سکڑاؤ کے فاسفوریلیشن کا استعمال کرتے ہوئے، سائڈ چین کی سجاوٹ میں بڑے گروپوں کی طرف سے پیدا ہونے والی سٹیرک رکاوٹ کی وجہ سے، امینو ایسڈ کے فاسفوریلیشن کے لیے پیپٹائڈ چین کے ساتھ سکڑنا مشکل ہے۔مستقبل میں، امینو ایسڈ کا تعارف زیادہ مشکل ہو گا، خاص طور پر متعدد فاسفوریلیشن سائٹس پر مشتمل سجاوٹ میں، نسل انتہائی مشکل ہو جائے گی، حتمی مصنوعات کی ساخت پیچیدہ، الگ کرنا مشکل ہے، اور پیداوار انتہائی کم ہے۔

لہذا، جب پیپٹائڈ چین میں متعدد سائٹس فاسفوریلیٹ ہوتے ہیں، تو کوئی بھی رال پر پیپٹائڈ کی ترتیب پیدا کرنے کا انتخاب کر سکتا ہے اور پھر اسے Ser، Tyr، یا Thr کے سائڈ چین ہائیڈروکسیل گروپ کے ذریعے فاسفوریلیٹ کر سکتا ہے: اس کی نسل میں بنیادی طور پر سلیکٹیو ہٹانا شامل ہوتا ہے۔ سائڈ چین حفاظتی گروپ جس کو پیپٹائڈ کی ترکیب کے بعد امینو ایسڈ کی شناخت کی ضرورت ہوتی ہے۔Tyr کے لیے، Thr براہ راست امینو ایسڈ استعمال کر سکتا ہے سائڈ چینز جواب میں محفوظ نہیں ہیں۔

سائیڈ چین پروٹیکشن بیس 1% TFA/DCM ماحول کو مقداری طور پر ہٹایا جا سکتا ہے۔جب یہ طریقہ منتخب کیا جاتا ہے تو، ڈائبینزائل فاسفورامائڈائٹ اور ٹیٹرازولیم کا استعمال کرتے ہوئے فاسفورامائڈائٹ ٹیٹرازولیم ایکٹیو انٹرمیڈیٹ تیار کیا جا سکتا ہے، جسے ہائیڈروکسیل گروپ سے منسلک کیا جاتا ہے، اور پھر رد عمل کو مکمل کرنے کے لیے پیروکسیسڈ ماحول میں فاسفوریل گروپ بنانے کے لیے آکسائڈائز کیا جا سکتا ہے۔