طویل پیپٹائڈ ترکیب کے مسائل اور حل

حیاتیاتی تحقیق میں، ایک طویل ترتیب کے ساتھ پولی پیپٹائڈس عام طور پر استعمال ہوتے ہیں۔ترتیب میں 60 سے زیادہ امینو ایسڈ والے پیپٹائڈس کے لیے، ان کو حاصل کرنے کے لیے عام طور پر جین کا اظہار اور SDS-PAGE استعمال کیا جاتا ہے۔تاہم، یہ طریقہ ایک طویل وقت لگتا ہے اور حتمی مصنوعات کی علیحدگی کا اثر اچھا نہیں ہے.

طویل پیپٹائڈ ترکیب کے لیے چیلنجز اور حل

لمبے پیپٹائڈس کی ترکیب میں، ہمیں ہمیشہ ایک مسئلہ کا سامنا کرنا پڑتا ہے، وہ یہ ہے کہ ترکیب میں تسلسل کے اضافے کے ساتھ گاڑھا ہونے والے رد عمل کی سٹرک رکاوٹ بڑھ جاتی ہے، اور رد عمل کو مکمل کرنے کے لیے رد عمل کے وقت کو ایڈجسٹ کرنے کی ضرورت ہوتی ہے۔تاہم، ردعمل کا وقت جتنا لمبا ہوتا ہے، اتنے ہی زیادہ ضمنی اثرات پیدا ہوتے ہیں، اور ہدف پیپٹائڈ کا ایک حصہ بنتا ہے۔اس طرح کی باقیات - پیپٹائڈ کی کمی والی زنجیریں طویل پیپٹائڈ ترکیب میں پیدا ہونے والی کلیدی نجاست ہیں۔لہٰذا، لانگ پیپٹائڈ کی ترکیب میں، کلیدی مسئلہ جس پر ہمیں قابو پانا ضروری ہے وہ ہے اعلیٰ معیار کے رد عمل کی حالتوں اور رد عمل کے طریقوں کو تلاش کرنا، تاکہ امینو ایسڈ کنڈینسیشن ری ایکشن کو مزید جامع اور مکمل بنایا جا سکے۔اس کے علاوہ، رد عمل کا وقت کم کریں، کیونکہ رد عمل کا وقت جتنا لمبا ہوگا، ضمنی رد عمل جتنا زیادہ بے قابو ہوگا، ضمنی مصنوعات اتنے ہی پیچیدہ ہوں گے۔لہذا، مندرجہ ذیل تین نکات کا خلاصہ کیا جاتا ہے:

مائکروویو ترکیب استعمال کیا جا سکتا ہے: ترکیب کے عمل میں پیش آنے والے کچھ امینو ایسڈز کے لیے جن کو مربوط کرنا آسان نہیں ہے، مائیکرو ویو ترکیب استعمال کی جا سکتی ہے۔یہ طریقہ قابل ذکر نتائج رکھتا ہے، اور رد عمل کے وقت کو بہت کم کرتا ہے، اور دو اہم ضمنی مصنوعات کی تشکیل کو کم کرتا ہے۔

ٹکڑے کی ترکیب کا طریقہ استعمال کیا جا سکتا ہے۔: جب کچھ پیپٹائڈس کو عام ترکیب کے طریقوں سے ترکیب کرنا مشکل ہوتا ہے اور اسے صاف کرنا آسان نہیں ہوتا ہے، تو ہم پیپٹائڈ کے ایک مخصوص حصے میں کئی امینو ایسڈز کی مکمل سنکشیشن کو مجموعی طور پر پیپٹائڈ چین تک اپنا سکتے ہیں۔یہ طریقہ ترکیب میں بہت سے مسائل کو بھی حل کرسکتا ہے۔

Acylhydrazide ترکیب استعمال کی جا سکتی ہے۔: پیپٹائڈس کی acylhydrazide ترکیب این ٹرمینل Cys پیپٹائڈ اور C-ٹرمینل پولی پیپٹائڈ ہائیڈرزائڈ کیمیکل سلیکٹیو ری ایکشن کے ٹھوس مرحلے کی ترکیب کا ایک طریقہ ہے جو پیپٹائڈ بانڈنگ طریقہ کو حاصل کرنے کے لیے امائیڈ بانڈز کی تشکیل کے درمیان ہوتا ہے۔پیپٹائڈ چین میں Cys کی پوزیشن کی بنیاد پر، یہ طریقہ پوری پیپٹائڈ چین کو متعدد سلسلوں میں تقسیم کرتا ہے اور بالترتیب ان کی ترکیب کرتا ہے۔آخر میں، ٹارگٹ پیپٹائڈ مائع فیز کنڈینسیشن ری ایکشن کے ذریعے حاصل کیا جاتا ہے۔یہ طریقہ نہ صرف طویل پیپٹائڈ کی ترکیب کے وقت کو بہت کم کرتا ہے، بلکہ حتمی مصنوعات کی پاکیزگی کو بھی نمایاں طور پر بڑھاتا ہے۔

طویل پیپٹائڈ طہارت

لمبے پیپٹائڈس کی خاصیت ناگزیر طور پر خام پیپٹائڈس کے پیچیدہ اجزاء کی طرف لے جاتی ہے۔لہذا، HPLC کے ذریعہ طویل پیپٹائڈس کو صاف کرنا بھی ایک چیلنج ہے۔polypeptide طہارت کے عمل کے amyloid سیریز، تجربے کی ایک بہت جذب اور کامیابی سے طویل پیپٹائڈ کی طہارت میں استعمال کیا جاتا ہے.نئے آلات کو اپنانے، ایک سے زیادہ پیوریفیکیشن سسٹمز کے اختلاط، بار بار علیحدگی اور دیگر تجرباتی طریقوں سے، طویل پیپٹائڈ پیوریفیکیشن کی کامیابی کی شرح بہت بہتر ہوئی۔